酶联免疫吸附检测肿瘤标志物辅助癌症早期诊断

组织解离:
方案一37°摇床消化法（此法细胞活率最高且能得到30%-50%肝实质细胞）
1. 把肝脏组织剪碎放入到含有10ml左右的组织解离液（10ml 1640+通用组织解离酶50ul）的15ml离心管中，并放入37°摇床（横着摆放），摇30分钟。
2. 消化结束后，如果发现还有未解离的小团块用滴管吹打30秒（如果还有不能吹散的小组织团块可以不用理会）然后用70um过滤网过滤。

3. 过滤完后转移到15ml离心管离心，500g 5min 升9降9。
4. 离完后，吸走上清，尽量吸干净，（不要倾倒，倾倒容易都倒出去）。
5. 用FLB2580 3ml（一半肝脏3ml，如果是一整个肝脏可以考虑用5ml）重悬沉淀，离心，常温3000g 5min 升9降0.
6. 离完后，弃上清，用staining buffer 重悬染色上机。

方案二 gentleMACS解离法（获得免疫细胞较多）
1. 把肝脏组织剪碎放入装有10ml左右的组织解离液（10ml 1640+通用组织解离酶50ul）的C管中。
2. 把管子插到gentleMACS上，倒扣后管底不要有组织碎片，选择程序37_h_TDK-3，开始程序。
3. 程序结束后，用70um过滤网过滤。
4. 过滤完后转移到15ml离心管离心，500g 5min 升9降9。
5. 离完后，吸走上清，尽量吸干净，（不要倾倒，倾倒容易都倒出去）。
6. 用FLB2580 3ml（一半肝脏3ml，如果是一整个肝脏可以考虑用5ml）重悬沉淀，离心，常温3000g 5min 升9降0.
7. 离完后，弃上清，用staining buffer 重悬染色上机。